<<

стр. 18
(всего 20)

СОДЕРЖАНИЕ

>>

мочи, при ее низкой относительной плотности
микроорганизмов переходит из бесцветного в
и рН ниже 5,0 может наблюдаться низкая сте-
красный нерастворимый в воде трифенилформа-
пень бактериурии п р и имеющемся заболевании.
зан. Интенсивность окраски находится в прямой
Поэтому, помимо степени бактериурии, следует
зависимости от степени бактериурии.
учитывать вид выделенных из мочи микроорга-
Готовят три раствора: 1) насыщенный рас-
низмов. Эшерихии, протей, синегнойная палоч-
твор двузамещенного фосфата натрия; 2) 750 мл
ка, клебсиеллы чаще выделяются из мочи боль-
ТТХ растворяют в 100 мл раствора 1; 3) рабо-
ных уроинфекцией. Дифтероиды, лактобациллы
чий раствор: 4 мл раствора 1 смешивают со
и другие грамположительные палочки обычно
100 мл раствора 2. Х р а н я т растворы в прохлад-
выделяются из мочи здоровых людей. Повторное
ном защищенном от света месте. Срок х р а н е н и я
выделение из мочи культуры одного вида, типа,
растворов 1 и 2 — до 2 мес, рабочего раствора —
в а р и а н т а свидетельствует о инфекционном про-
не более 2 нед.
При постановке реакции пользуются сте- цессе.
рильной посудой. Монокультура чаще выделяется при острых
К 2 мл мочи прибавляют 0,5 мл рабочего воспалительных процессах и коррелирует с вы-
раствора и помещают после перемешивания сокой степенью б а к т е р и у р и и . Ассоциации м и к -
в термостат при 37 °С. После 4-часовой инкуба- роорганизмов чаще встречаются при хрониче-
ции учитывают результаты. Появление на дне ских процессах.
пробирки красного осадка свидетельствует о н а - При окончательной оценке результатов мик-
5
л и ч и и в 1 мл мочи не менее 10 микробных кле- робиологического исследования мочи необходи-
мо учитывать данные к л и н и к и и другие лабора-
ток.
торные анализы.
Ускоренные методы позволяют дать немед-
ленный ответ. При использовании бактериологи-
7.3.3. Отделяемое при инфекциях
ческих методов лаборатория дает предваритель-
нижних дыхательных путей
ный ответ через день — после получения резуль-
татов определения степени бактериурии и окон-
Микробиологическое исследование проводят
чательный — через 3—4 дня, после выделения
при воспалительных заболеваниях дыхательных
микроорганизмов, их идентификации и опреде-
путей: пневмонии, бронхитах, плевритах, брон-
ления чувствительности к антибактериальным
хоэктатической болезни, абсцессе легкого и др.
препаратам. В окончательном ответе указывают
317
Э т и о л о г и я . Возбудителями воспалитель- верхности питательной среды. На поверхность
кровяного агара, засеянную исследуемым мате-
ных процессов нижних дыхательных путей могут
риалом, можно положить диски с сапонином,
быть бактерии, микоплазмы, вирусы, риккетсии,
чтобы создать селективные условия для роста
грибы и простейшие. Наиболее частыми возбу-
H. i n f l u e n z a e .
дителями среди бактерий являются Str. pneumo-
niae, Staph. aureus, Klebsiella pneurnoniae, Среды с посевами инкубируют при 37 °С в те-
чение 18—24 ч. Из выросших колоний выделяют
H. i n f l u e n z a e , Ps. aeruginosa и др.
При метастатических и аспирационных пнев- чистые культуры, идентифицируют их и опреде-
ляют чувствительность к антибактериальным
мониях с очагом инфекции в брюшной полости,
препаратам.
органах малого таза и забрюшинном простран-
стве доминируют неспорообразующие анаэробы При обнаружении в микроскопическом пре-
(бактероиды, пептококки), реже выделяются парате грибов делают посев на среду Сабуро или
клостридии. другие среды для в ы р а щ и в а н и я грибов. При по-
Взятие м а т е р и а л а для иссле- дозрении на туберкулез или микоплазменную
д о в а н и я . Исследуют мокроту, содержимое инфекцию делают посевы на соответствующие
бронхов, полученное при бронхоскопии, плев- среды.
ральную жидкость, аспираты и пунктаты из тра- Чтобы различить контаминацию мокроты
хеи, легочную ткань, полученную при пункции микрофлорой верхних дыхательных путей и по-
и биопсии легкого. лости рта, используют количественные методы
Наиболее информативно исследование пунк- исследования.
татов из легких, трахеи. Однако применение ука- Мокроту для количественного исследования
занных методов связано с определенным риском, [Селина Л. Г., Дорожкова И. Р., 1980] собирают
в связи с чем их следует использовать лишь при в стерильную банку с бусами для гомогенизации
тяжелых заболеваниях и при отсутствии мокро- материала или в обычную посуду, но перед посе-
ты или отрицательном результате ее исследо- вом растирают тщательно в ступках. В стериль-
вания. ную банку с бусами помещают 1 мл (0,5 мл) мок-
Мокроту для микробиологического исследо- роты, добавляют туда 9 мл (4,5 мл) 2 % пептон-
вания следует брать до начала антибактериаль- ной воды или питательного бульона. Смесь
ной терапии или через определенный промежу- встряхивают в течение нескольких минут, из по-
ток времени после введения препарата, необхо- лученной гомогенизированной мокроты готовят
димый для его выделения из организма больного. последовательные десятикратные разведения,
Исследуют утреннюю порцию мокроты. Перед добавляя к 0,1 мл мокроты 0,9 мл изотонического
сбором мокроты больной должен прополоскать раствора натрия хлорида. Затем по 0,1 мл полу-
рот кипяченой водой или слабым раствором ан- ченных разведений засевают на ч а ш к и с 5 %
тисептика, почистить зубы. Мокроту собирают кровяным агаром, растирая материал шпателем
в стерильную посуду — плевательницу, чашки по поверхности среды. Через сутки инкубации
Петри и пр. Наиболее информативно исследова- при 37 °С учитывают результаты: подсчитывают
ние мокроты, полученной при бронхоскопии, так однотипные по внешнему виду колонии, их число
как она практически не загрязнена микрофлорой умножают на 10, так как производят посев 0,1 мл
верхних дыхательных путей и полости рта. Хра- мокроты, и на степень разведения материала. Из
нить мокроту до исследования следует в холо- колоний готовят мазки, выделяют чистые куль-
дильнике при 4 °С не более 2—3 ч. При более туры, идентифицируют, определяют чувстви-
длительном хранении погибают малоустойчивые тельность к антибактериальным препаратам.
виды микроорганизмов (стрептококки), разви- Для выделения пневмококка можно внутри-
ваются процессы брожения и гниения, искажаю- брюшинно заражать белых мышей 0,5 мл взвеси
щие результаты исследования. первичного материала в бульоне или частью
Проведение и с с л е д о в а н и я . Ис- осадка после центрифугирования материала.
следуют гнойные комочки мокроты, которые мак- Через 6—8 ч у зараженной мыши берут экссудат
симально освобождают от микрофлоры верхних из брюшной полости, делают посев на чашки с
дыхательных путей промыванием их в чашке 5 % кровяным агаром, из остатка экссудата го-
Петри, содержащей изотонический раствор нат- товят мазки, которые окрашивают по Граму.
рия хлорида. Готовят мазки, растирая комочек Можно также забить зараженное животное и
мокроты между стеклами, окрашивают их по сделать посев крови из сердца на сывороточный
Граму и Цилю — Нильсену (для обнаружения бульон и ч а ш к и с кровяным агаром и мазки-от-
в мокроте туберкулезных палочек). При бакте- печатки из селезенки на предметном стекле (ок-
риоскопии мазков можно ориентировочно судить раска по Граму). При наличии пневмококка в
исследуемом материале на питательных средах
о характере и количестве микрофлоры в мокроте.
вырастет чистая культура.
Микроскопия мазка помогает также выявить
трудно культивируемые микроорганизмы. Ино- О ц е н к а результатов. Наиболее
гда бактериоскопия определяет характер куль- сложно определить этиологическую роль со-
турального исследования. держащихся в мокроте микроорганизмов, кон-
Посев мокроты (отмытых гнойных комочков) таминирующих ее при прохождении через верх-
производят на ряд питательных сред: 5 % кровя- ние дыхательные пути и ротовую полость. Для
ной агар (лучше использовать баранью или кро- разделения этой микрофлоры от микроорганиз-
личью кровь), среду Эндо, среду Левинталя, сре- мов н и ж н и х дыхательных путей используют ряд
ду для анаэробов. Посев производят шпателем, тестов. С помощью количественного метода
равномерно растирая комочек мокроты по по- определяют содержание в мокроте определен-
318
ного вида микроорганизмов, исходя из того, что микроорганизмов, не относящихся к естествен-
возбудитель находится в мокроте в значительно ной микрофлоре верхних дыхательных путей,
большем количестве, чем микробы-контаминан- или необычно большое количество микробов ка-
6 7
ты. Критическое число составляет 10 —10 . Рост кого-либо вида указывает на их этиологическую
микробов в меньших разведениях расценивают значимость в заболевании.
как контаминацию мокроты микрофлорой верх-
них дыхательных путей или показатель бакте-
7.3.5. Цереброспинальная жидкость
рионосительства. Следует, однако, учитывать,
что при проведении антибактериальной терапии
количественное обсеменение мокроты возбудите- Микробиологическое исследование церебро-
лем может уменьшаться. спинальной жидкости (ЦСЖ) необходимо в слу-
Определенное значение имеет вид выделен- чаях, подозрительных на менингит, а также при
ных микроорганизмов. Str. v i r i d a n s , Coryne- коматозных состояниях и неврологических симп-
bacterium, Neisseria, Staph. e p i d e r m i d i s состав- томах неясного генеза.
ляют нормальную микрофлору носоглотки. По- ЦСЖ в норме стерильна, поэтому положи-
этому как возбудителей заболевания их следует тельный результат микробиологического иссле-
учитывать только в случаях, когда их количество дования — это всегда расшифровка этиологи-
превышает обычное. Другие виды микроорга- ческого диагноза, своевременность постановки
низмов, находящихся в мокроте в разведениях, которого может в ряде случаев предотвратить
превышающих 106, следует учитывать и изучать смертельный исход заболевания.
их чувствительность к антибиотикам. Э т и о л о г и я менингитов очень разнооб-
Большое значение имеет первичная микро- разна. Наиболее часто из ЦСЖ выделяют сле-
скопия мазка из мокроты. Обнаружение в мазке дующие микроорганизмы: а) при гнойных ме-
видов микроорганизмов, не выросших на пита- нингитах — N. meningitidis, S. pneumoniae,
тельных средах, часто свидетельствует о неадек- S. aureus, Streptococcus групп А, В, D, H. i n f -
ватности этих сред. Поэтому нужно либо пред- luenzae, E. coli, Klebsiellae, Proteus, Pseudomo-
принять повторную попытку выделить эти куль- nas, Achromobacter, L. monocytogenes и др.,
туры, либо в ответе лаборатории указать на их б) при асептических менингитах — М. tuberculo-
обнаружение в микроскопическом препарате. sis, Leptospira, Cryptococcus neoformans, Toxo-
Следует также учитывать повторность обнару- p l a s m a gondii, вирусы.
жения и нарастание количества определенного В з я т и е п р о б ЦСЖ должно проводить-
вида микроорганизмов в клиническом образце в ся при строжайшем соблюдении правил асепти-
процессе заболевания. ки, исключающих кожную и воздушную конта-
минацию ЦСЖ. Первые капли ЦСЖ (до 1 мл)
Л и т е р а т у р а . Селина Л. Г., Дорожко- собирают в пробирку и направляют на цитоло-
ва И. Р. Количественный метод исследований в гическое исследование. Для посева используют
диагностике неспецифических заболеваний лег- следующую порцию жидкости, которую соби-
ких.— Журн. микробиол., 1980, № 2, с. 102— рают в стерильную пробирку в количестве 2—
106. 5 мл. При подозрении на туберкулезную или
грибковую этиологию менингита следует брать
7.3.4. Отделяемое при инфекциях не менее 10 мл ЦСЖ.
Учитывая, что один из ведущих возбудителей
носа и зева
менингита — N. meningitidis - чрезвычайно
Микрофлору верхних дыхательных путей чувствителен к охлаждению, взятые пробы
изучают при заболеваниях носа и зева, а также должны быть доставлены в лабораторию как
у больных пневмонией, не отделяющих мокроту можно скорее, а до этого сохраняться строго при
и при обследовании на бактерионосительство. 37 °С. Во всех случаях, подозрительных на ме-
Отделяемое из носа берут сухим стерильным нингит, помимо ЦСЖ, следует брать для микро-
ватным тампоном, который вводят в глубь поло- биологического исследования материал из пред-
сти носа. Материал из носоглотки берут стериль- полагаемого первичного очага инфекции: мазки
ным заднеглоточным тампоном, из зева — из носоглотки, среднего уха, ран после нейрохи-
увлажненным ватным тампоном. Тампоны поме- рургических и других оперативных вмеша-
щают в стерильные пробирки и доставляют в ла- тельств, производить посев крови.
бораторию в максимально короткий срок. Хра- Проведение и с с л е д о в а н и я . До-
нить тампоны с материалом следует в холодиль- ставленную в лабораторию пробу ЦСЖ центри-
нике не более 2—3 ч. Посев тампоном произво- фугируют при 2500—3000 об/мин 10 мин. Над-
дят на чашки Петри с 5 % кровяным агаром, ко- осадочную жидкость отсасывают стерильной
торые инкубируют 18—24 ч при 37 °С. Просмат- пипеткой в пробирку и используют для биохими-
ривают выросшие колонии, выделяют чистые ческого и серологического исследования. Остав-
культуры, идентифицируют их, определяют чув- шийся осадок и около 0,5 мл жидкости исполь-
ствительность к антибиотикам. Из материала, зуют для приготовления мазков и посева. Гной-
оставшегося на тампоне, делают мазки на стек- ный ликвор можно использовать для исследова-
ле, которые окрашивают по Граму и Нейсеру. ния без предварительного центрифугирования.
При оценке результатов исследования сле- До конца подготовительных операций ЦСЖ
дует учитывать качественный и количественный хранят при 37 °С. Из осадка делают 2 тонких
состав естественной микрофлоры, содер- мазка на стекле, окрашивают по Граму и мети-
жащейся в клиническом образце: обнаружение леновым синим и немедленно микроскопируют.
319
Нередко, особенно при нелеченых случаях ме- 7.3.6. Отделяемое
нингита, по типичной морфологии могут быть женских половых органов
выявлены такие возбудители, как N. meningi-
t i d i s , S. p n e u m o n i a e , H. i n f l u e n z a e (полиморф- Воспалительные заболевания половых орга-
ные грамотрицательные коккобациллы). Обна- нов могут быть вызваны микрофлорой, присут-
ружение в мазках неспоровых четко грамполо- ствующей в норме в этих органах, а также при
жительных коротких толстых палочек застав- восходящем, гематогенном, лимфогенном рас-
ляет заподозрить L. monocytogenes в качестве пространении микроорганизмов из других орга-
возбудителя менингита. Результаты первичной нов и тканей.
микроскопии служат основанием предваритель- Взятие м а т е р и а л а на исследо-
ной диагностики, которая немедленно сообщает- в а н и е проводит врач — акушер-гинеколог.
ся лечащему врачу и определяет ход дальней- Вульва, преддверие влагалища. Отделяемое
шего исследования (набор питательных сред, берут стерильным ватным тампоном. При вос-
условия культивирования). палении большой железы преддверия (барто-
Посев ЦСЖ производят на следующие пита- линовой железы) производят ее пункцию или
тельные среды. при вскрытии абсцесса железы гной берут сте-
рильным ватным тампоном.
1. По 1—2 капли осадка засевают петлей на
сывороточный агар ( и н к у б а ц и я в нормальной Влагалище. После введения зеркала и
атмосфере), на две чашки с 5 % кровяным ага- подъемника материал для исследования берут
ром (инкубация в анаэробных условиях и при стерильным ватным тампоном из заднего свода
или с патологически измененных участков сли-
10% содержании СО2), шоколадный агар, в
среды для анаэробов. зистой. Материал для посева должен быть взят
до проведения мануального исследования.
2. К осадку, оставшемуся в пробирке, добав-
ляют около 5 мл сывороточного полужидкого Шейка матки. После обнажения шейки мат-
агара (среда обогащения). Эту манипуляцию ки в зеркалах влагалищную часть ее тщательно
выполняют у пламени горелки, обжигая края обрабатывают ватным тампоном, смоченным
обеих пробирок, выливая расплавленный и стерильным изотоническим раствором натрия
остуженный полужидкий агар на осадок хлорида или водой. После этого тонкий ватный
тампон осторожно вводят в шеечный канал (не
ЦСЖ.
Все питательные среды должны быть свеже- касаясь стенок влагалища) и берут материал
приготовленными (не ранее чем за сутки до по- для исследования.
сева) и прогреты в термостате непосредственно Матка. Правильное взятие материала из
перед посевом. матки может быть выполнено только при исполь-
Проверку роста проводят после ночной инку- зовании специальных инструментов типа шпри-
бации и в дальнейшем ежедневно до появления ца-аспиратора, имеющего на зонде наружное
роста. При отсутствии роста в течение 7 дней вы покрытие. После прохождения зондом церви-
дается отрицательный результат. кального канала в полости матки раскрывают
При появлении роста на какой-либо из сред его н а р у ж н у ю оболочку и аспирируют содержи-
делают м а з к и , окрашивают по Граму, проводят мое. После этого закрывают наружную оболочку
посевы на плотные питательные среды для выде- и выводят зонд из матки.
ления культур и их идентификации. Придатки матки. При воспалительном про-
Особенности исследования ликвора при ту- цессе в придатках матки получение материала
беркулезе, сифилисе, листериозе, при менинги- из очага инфекции возможно только при опера-
тах, вызванных грибами и простейшими,— тивном вмешательстве (гной, экссудат, кусочки
см. соответствующие методические руко- органов) или при проведении диагностической
водства. пункции опухолевидных образований в малом
Оценка р е з у л ь т а т о в . Как отмеча- тазу, проводимой через влагалищные своды
лось, в подавляющем большинстве случаев вы- (при этом следует учитывать возможность кон-
деление микроорганизмов из ЦСЖ свидетельст- т а м и н а ц и и пробы влагалищной микрофлорой).
вует об их этиологической роли. В редких слу- В некоторых случаях, если очаг инфекции в при-
ч а я х выделение бактерий условно-патогенной датках матки сообщается с полостью матки,
группы может быть связано с контаминацией могут оказаться полезными повторные исследо-
ликвора при его взятии. В таких случаях, чтобы в а н и я отделяемого цервикального канала при
избежать диагностической ошибки, следует по- однотипных результатах исследования.
вторить исследование. В случаях менингита, вы- Взятый материал должен быть доставлен в
званного условно-патогенными видами, лечеб- лабораторию в ближайшие 1—2 ч.
При подозрении на анаэробную инфекцию
ные мероприятия не оказывают столь быстрого
посев должен быть выполнен сразу же после
стерилизующего эффекта, как при патогенных
взятия материала.
возбудителях. Кроме того, должна быть прове-
П р о в е д е н и е и с с л е д о в а н и я . Гото-
дена количественная оценка бактериального ро-
ста. вят мазки для бактериоскопии. Материал равно-
Отсутствие микрофлоры в п е р в и ч н ы х маз- мерно распределяют на стекле м я г к и м и движе-
ниями, не применяя грубого втирания и резких
ках ЦСЖ и отсутствие роста (или рост единич-
штриховых движений инструментом. Такая тех-
ных колоний) на плотных питательных средах
н и к а выполнения мазков позволяет клеткам рас-
при н а л и ч и и роста в жидких питательных средах
могут свидетельствовать о нарушении правил пределяться слоями, не повреждает их, сохра-
асептики при взятии ЦСЖ. няет истинное распределение и количественное
320
соотношение компонентов исследуемого мате- можно использовать следующие критерии при
риала. После высушивания при комнатной тем- штриховом посеве тампоном на '/2 чашки Петри
пературе мазки покрывают чистым предметным с кровяным агаром:
стеклом (или помещают в чашку Петри) и от- I — очень скудный рост — на плотных сре-
правляют в лабораторию. Хранение влажного дах роста нет, рост в жидкой питательной среде;
мазка, сдавленного между двумя стеклами, не- II — небольшое количество — на агаре до 10
допустимо. колоний микроорганизмов определенного вида;
В лаборатории микроскопируют первичные I I I — умеренное количество — на агаре 11 —
мазки после окраски их по Граму, метиленовым 100 колоний;
синим, по Романовскому (влагалищные м а з к и ) . IV — большое количество — на агаре более
100 колоний.
Материал, взятый на тампон, засевают
ш т р и х а м и на кровяной и шоколадный агар. Па- Рост I — II степени чаще всего свидетельст-
вует о контаминации, I I I — IV степени — об
тологический материал, доставленный в пробир-
ках (гной, содержимое тубоовариальных обра- этиологической роли данного микроорганизма.
зований), засевают по 0,1 мл, растирая шпате-
лем по поверхности кровяного и шоколадного
7.3.7. Содержимое
агара. Производят также посевы в сахарный
желудочно-кишечного тракта
бульон и среды для выделения анаэробов. Из
оставшегося материала готовят мазки для мик-
роскопии. Кусочки тканей размельчают, соблю- Возбудители, выделяемые при воспалитель-
дая стерильность, в микроразмельчителе тканей ных процессах различной локализации, в основ-
или в ступке с песком и засевают полученную ном являются представителями нормальной
взвесь на несколько чашек с плотными средами микрофлоры желудочно-кишечного тракта чело-
(кровяной агар, молочно-солевой агар, среду века. Для суждения об этиологической роли ус-
Эндо), а также в сахарный бульон и среды для ловно-патогенных микроорганизмов при различ-
выделения анаэробов. ных желудочно-кишечных расстройствах, в том
Посевы инкубируют при температуре 37 °С числе при диагностике кишечного дисбактерио-
аэробно, а также в анаэростате. При появлении за, важно знать критерии качественного и коли-
роста на плотных средах проводят подсчет числа чественного соотношения видов микробов в раз-
колоний, количественно оценивая соотношение личных отделах желудочно-кишечного тракта.
видов в данной микробной ассоциации. При по- У здорового человека микрофлора желудоч-
мутнении сахарного бульона делают мазок на но-кишечного тракта чрезвычайно разнообраз-
стекле (окраска по Граму) и высевы на плотные на, насчитывает более 60 видов и родов микро-
питательные среды (кровяной агар, молочно-со- организмов.
левой агар, среда Эндо). Взятие м а т е р и а л а на исследо-
Оценка результатов микробио- в а н и е . Полость рта. Материал для исследо-
л о г и ч е с к о г о исследования половой систе- вания берут стерильным ватным тампоном до
мы представляет определенные трудности, так начала лечения х и м и о п р е п а р а т а м и , до приема
как чаще всего регистрируют рост нескольких пищи, не ранее чем через 4—5 ч после местного
видов микроорганизмов условно-патогенной лечения. Обычно воспалительно измененная об-
группы. В каждом конкретном случае следует ласть видна на глаз (гиперемия, отек, экссуда-
учитывать совокупность признаков: данные м и к - ция, гной, пленки). При н а л и ч и и свищей (напри-
роскопии первичных мазков исследуемого мате- мер, при актиномикозе языка) берут для иссле-
риала, результаты прямого посева на плотные дования отделяемое свища или биопсированный
среды (количественная оценка роста различных материал. Из десневых карманов материал по-
видов), а также клинические проявления забо- лучают стерильной кюреткой или тонким ватным
левания и анамнез больной. Так, при исследова- тампоном. Из зубного канала — стерильной иг-
нии материала из закрытых полостей (пунктаты лой-адсорбентом, которую вставляют в канал
опухолевидных образований в малом тазу, око- с соблюдением правил асептики примерно на
лоплодные воды), а также органов, в норме сте- I минуту, затем извлекают и помещают в пита-
рильных (содержимое полости матки, кусочки тельную среду.
органов, тканей, удаляемых при полостных опе- Пищевод и желудок. Материал для посева
р а ц и я х ) , рост микроорганизмов, особенно моно- получают при эзофагоскопий и гастроскопии.
культуры в сочетании с находками микроорга- Рвотные массы направляют на бактериологиче-
низмов сходной морфологии в первичных маз- ское исследование, несмотря на то что собирают
ках, с определенностью свидетельствует об их их в нестерильную посуду. То же относится к
этиологической роли в воспалительном про- промывным водам желудка.
цессе. Тонкий кишечник. Материал берут через же-
При исследовании материала из мест, в нор- лудок с помощью специально сконструирован-
ме имеющих разнообразную микрофлору, боль- ного зонда, который открывают на определенном
шое значение принадлежит количественной участке, и после взятия содержимого снова за-
оценке различных видов бактерий, выросших крывают.
при первичном посеве на плотные среды, одно- Толстый кишечник. Исследованию подвер-
типности результатов при повторных исследова- гают испражнения, забирая материал стериль-
ниях, а также клиническим д а н н ы м . ной деревянной палочкой, и помещают в пробир-
Для ориентировочной оценки количествен- ку. При необходимости и з у ч е н и я микрофлоры
ного соотношения в микробных ассоциациях воспалительно измененных участков слизистой

321
оболочки взятие содержимого проводят при рек- Т а б л и ц а 48. Критерии нормы кишечной
микрофлоры [по Эпштейн-Литвак Р. В. и Виль-
тороманоскопии с пораженных участков. Мате-
шанской Ф. Л., 1977]
риал должен быть доставлен в лабораторию в
течение 1 ч, так как при более длительном хране-
Микрофлора Норма
нии значительно нарушаются экологические
взаимоотношения между видами.
Ж е л ч ь получают при зондировании две- Патогенные микробы семейства
надцатиперстной кишки. Исследуют все 3 пор- кишечных 0
ции желчи. Общее количество кишечной па-
П р о в е д е н и е и с с л е д о в а н и я . Для лочки, млн/г 300—400
посева патологического материала из различных Кишечная палочка со слабо вы-
отделов желудочно-кишечного тракта используют раженными ферментативными
следующие плотные питательные среды: сре- свойствами, % До 10
да Эндо, кровяной агар, молочно-солевой агар, Лактозонегативные энтеробак-
агар Сабуро. Посев на набор сред производят терии, % » 5
шпателем, используя определенную дозу патоло- Гемолизирующая кишечная па-
гического материала (или его разведения), лочка, % 0
чтобы определить количество колоний различ- Кокковые формы в общей сумме
ных видов микроорганизмов в данной пробе. микробов, % До 25
Инкубацию посевов производят в аэробных Гемолизирующий стафилококк
условиях при 37 °С (посев на среде Сабуро, кро- по отношению ко всем кокковым
ме того, и при комнатной температуре). При по- формам, % 0
явлении роста подсчитывают число колоний раз- 7
Бифидобактерии 10- и выше
личной морфологии и отсевают по 2—3 колонии Микробы рода Протея 0
каждого вида для дальнейшей биохимической » » Кандида 0
идентификации и серологического типирования.
При диагностике кишечного дисбактериоза
необходим количественный учет как аэробной,
так и анаэробной микрофлоры кишечника. Ме- При исследовании желчи могут быть получе-
тодика исследования описана в методических ны не совпадающие результаты в трех пробах,
рекомендациях Р. В. Эпштейн-Литвак и однако на этом основании нельзя надежно су-
Ф. Л. Вильшанской «Бактериологическая диаг- дить о локализации воспалительного процесса.
Прогностически неблагоприятно расценивают
ностика дисбактериоза кишечника» (М., 1977)
выделение из желчи различных энтеробактерий
и в книге В. Г. Петровской и О. П. Марко «Мик-
(чаще эшерихий, клебсиелл, протея), синегной-
рофлора человека в норме и патологии» (М.,
ной палочки, бактероидов, особенно в количест-
1976).
ве более 103 клеток в 1 мл.
О ц е н к а р е з у л ь т а т о в . В связи с тем
Таким образом, выделение в большом коли-
что исследованию подвергают пробы, в норме
честве условно-патогенных бактерий из содер-
содержащие разнообразную микрофлору, веду-
жимого желудка, тонкой кишки, в пробах жел-
щее значение принадлежит количественной
чи является прогностически неблагоприятным,
оценке различных видов в ассоциациях, выде-
служит показателем необходимости проведения
ляемых из патологического материала, и срав-
соответствующих лечебных мероприятий, осо-
нению полученных результатов с нормальным
бенно при предоперационной подготовке
составом биоценоза данной области.
больных.
Для установления этиологической роли вы-
деленных микроорганизмов необходимо устано-
вить значительное преобладание данного вида в
7.3.8. Отделяемое ран и выпотов
ассоциации или отметить присутствие в очаге
инфекции видов микроорганизмов, несвойствен-
Раны. Микробиологическое исследование
ных данному месту.
ран имеет значение для постановки этиологи-
Микробиологическая диагностика кишечного
ческого диагноза в каждом конкретном случае
дисбактериоза основана на количественной
заболевания, а также важно в эпидемиологиче-
оценке содержания различных видов облигат-
ском плане, так как раневая инфекция является
ной и факультативной групп в микроценозе тол-
ведущей формой проявления госпитализма в
гтого кишечника. При дисбактериозе резко на-
настоящее время.
рушается равновесие состава микрофлоры. Про-
Практически все УПМ могут вести к разви-
исходит значительное снижение количества
тию раневой инфекции, особенно на фоне ослаб-
облигатных анаэробных видов и в первую оче-
ления защитных механизмов организма челове-
редь бифидофлоры и увеличение количества
ка. В настоящее время ведущая роль в этиоло-
аэробных видов, в частности эшерихий, число
гии раневой инфекции принадлежит золотисто-
которых может превышать 10" клеток/г фека-
му стафилококку и грамотрицательным палоч-
лий. Параллельно увеличивается содержание
кам семейств Enterobacteriaceae и Pseudomo-
различных видов факультативной группы, кото-
nadaceae. Кроме того, на фоне все большего
рые в некоторых случаях становятся преобла-
использования антибиотиков широкого спектра
дающими. Критерии нормы микрофлоры толсто-
действия увеличивается значение анаэробных
го кишечника, согласно методическим рекомен-
неспорообразующих бактерий, грибов.
дациям, приведены в табл. 48.
322
Взятие м а т е р и а л а на исследо- после посева патологического материала. При
в а н и е . Раневое отделяемое берут стерильными микроскопии мазков отмечают морфологию и ко-
ватными тампонами из глубины раны до обра- личество микроорганизмов. Выделяемые при
ботки ее антисептическими растворами. Там- этом особенности могут внести коррекцию в ход
поны срочно направляют в бактериологическую исследования — использование добавочных пи-
лабораторию. При наличии в ране дренажа тательных сред.
отделяемое берут стерильным шприцем, из кото- Исследование выпотов. Все выпоты, подозри-
рого оно переносится с соблюдением правил тельные на экссудат, следует направлять на
асептики в стерильную пробирку или анаэроб- микробиологическое исследование. Соблюдая
ный флакон. Удаляемые при обработке раны правила асептики, пунктируют иглой полость и
кусочки тканей отправляют в лабораторию в отсасывают содержимое с помощью шприца. Из
стерильных чашках Петри. шприца патологический материал переносят у
Проведение и с с л е д о в а н и я . По- пламени горелки в стерильный анаэробный фла-
сев раневого отделяемого непосредственно с кон и отправляют в лабораторию.
тампона производят на питательные среды в сле- В лаборатории прозрачную жидкость цент-
дующем порядке. рифугируют 15—20 мин при 3000 об/мин и оса-
1. Кровяной агар (посев штрихом на ' / 2 док используют для посева и приготовления маз-
чашки Петри). ков. При гнойном характере проб готовят тонкие
2. Сахарный бульон. мазки для микроскопии без предварительного
3. Среда для анаэробов. Тампон оставляют центрифугирования. Посев проб производят на
в пробирке. кровяной агар, сахарный бульон, среду для
Жидкие пробы засевают на плотную среду анаэробов. Кроме того, используют специальные
петлей. Предпочтительнее производить посев по питательные среды в зависимости от особенно-
0,1 мл разведенной до 10-' и неразведенной про- стей источника выпота. Так, плевральный выпот
бы, растирая материал по поверхности пита- чаще всего наблюдается у больных с туберку-
тельной среды шпателем. В жидкие питательные лезом легких, поэтому после центрифугирова-
среды посев производят пастеровской пипеткой. ния осадок дополнительно засевают на среды
При посеве на анаэробы пипетку с исследуемым для культивирования туберкулезной палочки
материалом опускают на дно пробирки, не до- или заражают патологическим материалом мор-
пуская попадания пузырьков воздуха в среду. скую свинку. При эмпиемах часто возбудителем
Кусочки тканей режут стерильными ножни- может быть пневмококк, стрептококк группы А,
цами, взвешивают в стерильной чашке Петри и золотистый стафилококк, Haemophilus i n f l u e n -
измельчают в стерильной ступке с питательным zae, анаэробы. Следовательно, в набор пита-
бульоном из расчета 1 мл бульона на 1 г ткани. тельных сред должны быть включены сыворо-
Затем делают десятикратные разведения взвеси точные среды, шоколадный агар, среды для ана-
до 10- 3 (0,9 мл бульона и 0,1 мл взвеси=10-'; эробов. При исследовании синовиальной жидко-
0,9 мл бульона и 0,1 мл разведения 1 0 - ' = 10- 2 сти следует использовать питательные среды для
и т. д.). По 0,1 мл каждого разведения засевают выделения гонококка.
на кровяной агар. О ц е н к а р е з у л ь т а т о в . Интерпрета-
Подсчет КОЕ/г ткани производят с учетом ция полученных данных обычно не представляет
числа выросших колоний и сделанных разве- трудностей, так как при условии соблюдения
дений. правил асептики во время взятия патологическо-
Посевы инкубируют аэробно и анаэробно при го материала и из закрытых полостей, и из глу-
37 °С. Посевы просматривают ежедневно. При бины гнойных ран (очаги инфекции) выделен-
появлении роста на плотной среде изучают мор- ные микроорганизмы являются возбудителями
фологию колоний. Дается количественная оцен- данного инфекционного процесса.
ка роста. В случаях выявления колоний разли- При выделении ассоциаций микроорганиз-
чной морфологии подсчитывают число колоний мов из раневого отделяемого ведущее значение
каждого вида микроорганизмов. При этом вы- в течение раневого процесса следует отдавать
являют ведущий вид в ассоциации. По 2—3 ко- видам, количественно преобладающим в данном
лонии каждого типа отсевают на соответствую- микроценозе. Имеются следующие критерии ко-
щие питательные среды для дальнейшей иден- личественной оценки микробного роста при пря-
тификации. мом штриховом посеве тампоном раневого отде-
При появлении роста в жидких питательных ляемого на '/2 чашки Петри с плотной питатель-
средах готовят мазки (окраска по Граму), с са- ной средой:
харного бульона производят посевы на кровяной I — очень скудный рост — рост только в
агар, среду Эндо, молочно-солевой агар. Отри- жидких средах, на плотной питательной среде
цательный результат исследования выдают че- рост отсутствует;
рез 7 сут при отсутствии роста на всех пита- II — небольшое количество—на плотной
тельных средах. среде рост до 10 колоний;
Микроскопия мазков раневого I I I — умеренное количество — на плотной
о т д е л я е м о г о . Для приготовления мазков среде рост от 11 до 100 колоний;
отделяемого ран следует использовать отдель- IV — большое количество — рост на плотной
ные тампоны, которыми забирают патологиче- среде более 100 колоний.
ский материал и переносят его на стекло. Мазки Показано, что уровень обсемененности тка-
окрашивают по Граму. Если в лабораторию до- ней в ране, равный 105 КОЕ/г, является крити-
ставлен только один тампон, то мазок готовят ческим. Превышение этого уровня указывает на
323
большую вероятность развития гнойной инфек- бенно в случаях хронического или катарального
ции и возможность генерализации инфекцион- конъюнктивита, наиболее выраженного в на-
ного процесса. При обсемененности менее р у ж н ы х углах глаз, следует использовать среду
105 КОЕ/г ткани раны заживают без явлений Леффлера для выделения моракселл.
нагноения. Все питательные среды после посева на них
Количественная оценка микробной обсеме- отделяемого инкубируют п р и 37 °С 24—48 ч.
ненности жидких проб (КОЕ/мл) имеет особое Часто рост появляется только через 48 часов.
значение при повторных исследованиях, так как При появлении роста делают мазки на стекле,
характеризует д и н а м и к у течения гнойно-воспа- которые окрашивают по Граму и производят
лительного процесса, являясь показателем эф- высевы с жидких питательных сред на плотные
фективности терапевтических мероприятий, в среды: кровяной агар, среду Эндо, молочно-со-
частности химиотерапии. левой агар, агар Сабуро. Другие среды исполь-
зуют при соответствующих показаниях.
О ц е н к а р е з у л ь т а т о в . Выделение и з
7.3.9. Отделяемое глаз и ушей патологического материала истинно патогенных
м и к р о о р г а н и з м о в несомненно свидетельствует
Глаза. Воспалительные заболевания глаза об их этиологической роли в воспалительном
чаще всего локализуются на конъюнктиве, сли- процессе.
зистой оболочке век, слезном мешке, реже затра- Обнаружение микроорганизмов условно-па-
гивают роговицу. Инфекция внутренних сред тогенной группы при условии соблюдения пра-
глазного яблока может развиться в результате вил асептики в момент взятия материала сви-
гематогенного ее распространения при септиче- детельствует об их участии в воспалительном
ском процессе или после операций на глазном процессе тканей глаза или является показате-
яблоке, особенно у ослабленных больных после лем высокого риска развития воспалительного
длительных курсов антибиотике- и гормонотера- процесса в ближайшем будущем, особенно в слу-
п и и . Ведущую роль как возбудители занимают ч а я х , когда больным предстоят оперативные
представители условно-патогенной группы мик- вмешательства на органе зрения.
роорганизмов. Уши. В з я т и е м а т е р и а л а для микро-
биологического исследования при срединном
Взятие материала для микробиологического
отите проводит врач-отоларинголог, используя
исследования производят до местного приме-
стерильные инструменты. Отделяемое берут сте-
нения антибиотиков и других медикаментов. Его
рильным ватным тампоном. Наиболее достовер-
выполняет врач-окулист в присутствии лаборан-
ные результаты исследования получают при
та-микробиолога, который сразу производит по-
п у н к ц и и среднего уха через непрорвавшуюся
сев взятого материала на принесенные пита-
барабанную перепонку. При наружном отите
тельные среды.
следует обработать кожу прилегающих областей
При н а л и ч и и гнойного отделяемого исполь-
раствором антисептика, чтобы при взятии мате-
зуют стерильные ватные тампоны, которыми
риала не было к о н т а м и н а ц и и тампона сапро-
забирают гной с внутренней поверхности нижне-
фитной микрофлорой.
го века к внутреннему углу глазной щели. Необ-
ходимо следить, чтобы ресницы при моргании не П р о в е д е н и е и с с л е д о в а н и я . Ма-
касались тампона (придерживать веки р у к а м и ) . териал засевают на кровяной агар, шоколадный
При отсутствии видимого гноя следует поль- агар (штриховой посев тампоном, которым бра-
зоваться тампонами, смоченными стерильным ли отделяемое), а также на с а х а р н ы й бульон и
изотоническим раствором, чтобы собрать на там- среду для анаэробов. Проводят микроскопию
пон как можно больше скудного отделяемого. первичных мазков отделяемого, окрашенных по
Секрет из слезного мешка берут стерильным Граму.
ватным тампоном после осторожного массажа. И н к у б а ц и ю посевов на жидких средах прово-
Материал с роговицы берут платиновой пет- дят в аэробных условиях при 37 °С, кровяной
лей после местного обезболивания. Соскобы с агар — в атмосфере с 5 % СО2. Посевы про-
конъюнктивы и роговицы для выявления эозино- сматривают ежедневно. Отрицательный резуль-
филов и телец включения производят инструмен- тат исследования выдается при отсутствии ро-
том, с которого материал переносят на предмет- ста в течение семи суток. При появлении роста
ные стекла. Мазки отделяемого на стекле для на плотных питательных средах проводят его ко-
первичной микроскопии выполняют параллельно личественную оценку и отсевают 2—3 колонии
со сбором материала для микробиологического различной морфологии для последующей иден-
исследования. тификации. С жидких сред делают мазки на
П р о в е д е н и е и с с л е д о в а н и я . При стекле для микроскопии (окраска по Граму) и
скудном отделяемом используют только жидкие производят высевы на кровяной агар, молочно-
питательные среды, такие, как среды накопле- солевой агар, среду Эндо.
ния — сахарный бульо.н и среда для анаэробов. О ц е н к а р е з у л ь т а т о в . При острых
При более ' обильном отделяемом необходимо воспалительных процессах обычно высевают в
использовать кровяной агар, сывороточный большом количестве монокультуры микроорга-
агар, шоколадный агар. При подозрении на го- низмов и их этиологическая значимость не вы-
нококковую или дифтерийную этиологию конъюн- зывает сомнения. Более трудна интерпретация
ктивита используют соответствующие среды. результатов микробиологического исследования
При выявлении в первичных мазках толстых при хронических воспалительных процессах, ко-
коротких грамположительных диплобацилл, осо- гда выявляют ассоциации бактерий. В т а к и х
324
консистенции пасты. Затем производят посев на
случаях важна количественная оценка роста
необходимые среды. После отстаивания пробы
различных видов в ассоциации при первичном
посеве патологического материала на плотные часть супернатанта используют для приготов-
питательные среды. Виду, преобладающему ко- ления мазков, которые окрашивают по Граму и
личественно, по-видимому, принадлежит веду- Цилю—Нильсену, и для внутрибрюшинного за-
щая роль в этиологии инфекционного процесса, ражения морских свинок и мышей. Состояние
и характеристика биологических свойств этого животных проверяют ежедневно и после их
вида (в том числе антибиограмма) наиболее смерти проводят микробиологическое исследова-
важна для выбора тактики лечебных меро- ние органов.
Выбор питательных сред для посева зависит
приятий.
от характера патологического процесса, его
локализации, подозреваемых возбудителей.
В ряде случаев следует помнить о редких пато-
7.3.10. Материал, генных микроорганизмах и использовать специ-
полученный на операции и во время альные среды. Не может быть однотипного
патологоанатомического исследования перечня сред для всех случаев, но такие среды,
как кровяной агар, шоколадный агар, среды для
выделения анаэробов, микобактерий и грибов,
следует использовать всегда.
Материал, полученный на операции. В ряде
Материал, полученный во время патолого-
случаев материал из очага инфекции может
анатомического исследования. Посмертная ин-
быть получен только при оперативном лечении.
вазия тканей и органов микроорганизмами —
Взятие м а т е р и а л а на исследо-
нормальными обитателями кишечника и слизи-
в а н и е . Оперирующий врач берет кусочки
стых оболочек значительно снижает ценность
патологически измененных тканей с помощью
стерильных инструментов. Из закрытых флюкту- бактериологического исследования трупного
материала. Большое значение в получении
ирующих образований содержимое аспирируют
достоверных результатов принадлежит соблю-
с помощью толстой иглы и шприца. Взятый ма-
дению стерильности при взятии проб. Значитель-
териал хирург должен поместить в стерильную
ное число ложноположительных результатов
посуду и направить в лабораторию.
материала аутопсий связано с контаминацией
В ряде случаев с операций поступает в лабо-
проб персоналом, проводящим вскрытие.
раторию материал, контаминированный нор-
мальной микрофлорой. Такие, например, пробы, Кровь для посева берут стерильным шприцем
как удаленные небные миндалины, в лаборато- после п р и ж и г а н и я раскаленным шпателем пред-
сердия или желудочка сердца. По 5—10 мл
рии следует обработать прижиганием или про-
греванием в кипящей воде в течение 5—10 с для крови засевают тут же в сахарный бульон.
Пробы других тканей получают после прижига-
снятия поверхностной контаминации. Затем
ткань рассекают стерильным скальпелем и ния поверхностей, проходя стерильным тампо-
используют для посева центральную часть. ном или пастеровской пипеткой через обработан-
ную зону. Предпочтительным следует считать
При микробиологическом исследовании тка-
взятие блоков тканей около 1 см3, которые выре-
ней следует учитывать результаты срочного
зают из обожженной зоны с помощью стерильных
гистологического исследования удаленных тка-
инструментов. Пробы помещают в стерильные
ней. Обращают внимание на характер гисто-
патологии исследуемых тканей — имеется вос- чашки Петри и доставляют в лабораторию. При
подозрении на бактериальный эндокардит часть
палительный или неопластический процесс. Если
рыхлых разрастаний извлекают стерильными
доказан невоспалительный характер процесса,
инструментами и помещают в стерильную чашку
отпадает необходимость в микробиологическом
Петри. В лаборатории пробы тканей промывают
исследовании. Если подтверждается наличие
стерильным изотоническим раствором натрия
воспалительного процесса, в некоторых случаях
результаты гистологического исследования хлорида и размельчают в размельчителе тканей
с добавлением питательного бульона. Из гомо-
могут послужить основанием к отбору
гената готовят мазки, красят по Граму. Произ-
определенных питательных сред и методик
водят посевы гомогената на кровяной агар, шо-
исследования.
коладный агар, на среды для культивирования
П р о в е д е н и е и с с л е д о в а н и я . Жид-
анаэробов и при показаниях на другие питатель-
кие пробы должны быть проверены на наличие
ные среды. Инкубацию сред проводят аэробно
гранул и подвергнуты микроскопии в мазках,
и в атмосфере СО2 при 37 °С, просматривая
окрашенных по Граму. Кусочки тканей перед
посевы ежедневно. При отсутствии роста отри-
посевом тщательно размельчают. При подозре-
цательный результат исследования выдают
нии на Cryptococcus neoformans не следует
через 7 сут (за исключением тех возбудителей,
растирать ткани, так как при такой обработке
которые требуют более длительного куль-
эти микроорганизмы теряют жизнеспособность.
тивирования — микобактерий, патогенные
Ткани мелко режут ножницами и используют
грибы).
большие дозы для посева на среды для культи-
вирования грибов. После этого нарезанную Ткани всех плодов и новорожденных, погиб-
ткань переносят в стерильный размельчитель ших при подозрении на инфекцию, должны быть
тканей и после добавления небольшого количе- исследованы на листерии. Наиболее часто эти
ства питательного бульона или изотонического микроорганизмы выделяют из мозговой ткани,
раствора натрия хлорида размельчают пробу до печени, селезенки.

325
7.4. Д И Ф Ф Е Р Е Н Ц И А Ц И Я И И Д Е Н Т И Ф И К А Ц И Я
БАКТЕРИЙ — ВОЗБУДИТЕЛЕЙ
ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

7.4.1. Грамотрицательные аэробные, Семейство энтеробактерий
факультативно-анаэробные палочки (Enterobacteriaceae) объединяет трибы, роды,
средних размеров виды (табл. 50) грамотрицательных палочек
среднего размера, подвижных и неподвижных,
Род псевдомонас (Pseudomonas) обладающих и необладающих капсулой, не
объединяет грамотрицательные средних разме- имеющих диагностических включений и не обра-
ров, п р я м ы е или слегка изогнутые, подвижные зующих спор. Они хорошо растут на питатель-
палочки, равномерно окрашенные, не имеющие ных средах при температуре 37 ± 3 °С и не тре-
диагностически значимых включений, спор и буют дополнительных питательных добавок в
характерного расположения. На плотных пита- виде специальных факторов роста.
тельных средах представители рода формируют Энтеробактерий обладают высокой фермен-
сероватые, непрозрачные, плоские с неровными тативной активностью в отношении углеводов,
краями колонии. Многие виды вырабатывают близких к углеводам источников углерода, спир-
разного цвета пигмент. Для P. aeruginosa там, органическим кислотам и аминокислотам.
характерно образование сине-зеленого пигмента На основании разнообразия набора ферментов
и своеобразного запаха «жасмина». На кровя- к вышеуказанным субстратам сконструированы
ном агаре наблюдается хорошо выраженная диагностические среды для выделения (среды
гемолитическая активность. Являясь строгими Эндо, Левина, Плоскирева, висмутсульфит-
аэробами, бактерии окисляют углеводы. Пред- агар и т. д.) и многокомпонентные среды для
ставители рода подразделены на большое коли- первичной дифференциации выделенных
чество видов. P. m a l l e i и P. pseudomallei — воз- культур.
будители особо опасных заболеваний (сап, мие- Отсутствие фермента оксидазы при способ-
лоидоз). ности редуцировать нитраты является характер-
Дифференциальные признаки видов псевдо- ным признаком, отличающим энтеробактерий
монас, которые могут иметь значение в этиоло- от представителей других семейств и родов этой
гии гнойно-воспалительных процессов человека, группы бактерий, имеющих значение в патоло-
представлены в табл. 49. Среди них P. aerugi- гии человека.
nosa имеет наибольший удельный вес. Первоначально изучают особенности коло-
При росте P. aeruginosa на скошенной части ний, выросших на первичных средах выделения
многокомпонентных сред типа Олькеницкого, (табл. 51). Для проведения идентификации ко-
Клиглера образуется темный пигмент с серебря- лонии засевают на одну из плотных многоком-
ным блеском без изменения цвета в столбике. понентных дифференциально-диагностических
Для внутривидовой идентификации P. aeru- сред (среда Олькеницкого с двумя, тремя угле-
ginosa применяют серологические методы водами, среда Клиглера, трехсахарный желези-
исследования с групповыми и факторными диаг- стый агар типа TSI, лизин-железистый агар,
ностическими сыворотками в реакции агглюти- среда Ресселя с мочевиной) и цитратную среду
н а ц и и на стекле. Симонса.
Т а б л и ц а 49. Внутриродовая дифференциация некоторых видов псевдомонас




П р и м е ч а н и я . 1 — штаммовые различия; 2 — замедленная реакция.

326
7.4.2. Грамотрицательные аэробные
Т а б л и ц а 50. Классификационная схема
семейства энтеробактерий '. По кн.: Определи- и факультативно-анаэробные мелкие
тель бактерий Берги. Изд. 8-е, 1974 палочки и коккобациллы
Род Вид (подрод)
Триба
Р о д г е м о ф и л о в (Haemophilus) объеди-
няет мелкие грамотрицательные палочки, не рас-
Escherichieae 1. Escherichia E. coli
тущие на простых питательных средах. Среди
2. Edwardsiella
7 видов рода гемофилус (H. p a r a i n f l u e n z a e ,
E. tarda
H. aphrophilus, H. ducreyi, H. i n f l u e n z a e и др.),
3. Citrobacter C. freundii
которые выделяют при болезнях человека, наи-
C. intermedius
больший удельный вес принадлежит палочке
4. Salmonella Подрод I
инфлюэнцы (Haemophilus i n f l u e n z a e ) .
Подрод II
Характерной особенностью представителей
(S. salamae)
данного рода является их требовательность для
Подрод III
своего культивирования в факторах роста крови
(S. arizonae)
X (гемин) и V (NAD).
Подрод IV
Для выделения и культивирования гемофи-
(S. houtenae)
лов применяют питательные агары с высоким
5. Shigella S. dysenteriae
(1,6 г/л) содержанием аминного азота и 8—
S. flexneri
10 % нативной или гретой крови животных или
S. boydii
человека.
S. sonnei
Оптимальной средой является шоколадный
K l e b s i e l l e a e 1. Klebsiella K. pneumoniae
агар. При использовании для него лошадиной
K. rhinosclero-
крови среду прогревают в водяной бане
matis
при 75 °С до шоколадного цвета, человеческой
K. ozaenae
крови — не менее 30 мин. При исполь-
2. Enterobacter E. cloacae
зовании дефибринированной кроличьей
E. aerogenes
крови прогревание среды ограничивается 5—
3. Hafnia H. alvei
6 мин при 80 °С. Рост культуры значительно
4. Serratia S. marcescens
улучшается, если создать повышенную (10 %)
Proteae 1. Proteus P. vulgaris
концентрацию СО2 (культивирование «со све-
P. mirabilis
чой»).
P. morganii
На плотных средах с нативной кровью гемо-
P. rettgeri
филы растут в виде очень мелких (^ 0,5 мм
P. inconstans
в диаметре) прозрачных колоний. На шоколад-
Y e r s i n i e a e 1. Yersinia Y". pestis
ном агаре образуются более крупные, полупро-
Y. enterocoliiica
зрачные, нежные, сочные колонии диаметром
Y. pseudotu-
0.5—2 мм. Выросшие колонии гемофилов легко
ilosis
снимаются со среды. При росте на шоколадном
агаре палочка инфлюэнцы обладает «мыши-
ным» запахом, что является характерным свой-
' Bergey's m a n u a l of determinative bacterio-
ством этого вида микробов. При росте H. i n f l u -
logy — 8th ed — Baltimore: The Williams,
enzae на плотных питательных средах можно
W i l k i n s Company, 1974— 1268 p.
наблюдать: слизистые колонии — круглые, рых-
лые, сочные, сероватые, ирригирующие при про-
смотре в косопроходящем свете (М-формы);
в мазках, окрашенных по Граму, видны мелкие
Особенности ферментации субстратов много-
короткие грамотрицательные палочки; при окра-
компонентных сред представлены в табл. 52,
ске мазка тушью по Гинсу выявляется хороню
позволяют ориентировочно определить трибу,
выраженная капсула; круглые, гладкие, полу-
род энтеробактерий.
прозрачные неирризирующие колонии (S-фор-
Вид выделенных культур устанавливают в
м а ) ; в мазках— мелкие грамотрицательные
соответствии с минимальным набором тестов,
палочки, капсула выражена слабо или отсут-
которые четко дифференцируют внутриродовые
ствует.
различия энтеробактерий (табл. 53—56).
После микроскопирования подозрительные
Для ускорения идентификации можно при-
колонии отсевают на шоколадный агар для про-
менить системы индикаторных бумажек (СИБ),
ведения дальнейшей идентификации культур по
выпускаемые Горьковским НИИЭМ МЗ
биохимическим тестам.
РСФСР (Методические рекомендации по приме-
Основные свойства видов и их дифференциа-
нению СИБ для идентификации энтеробактерий,
ция приведены в табл. 57.
1982). Для уточнения видовой (групповой)
Серологический анализ H. i n f l u e n z a e прово-
принадлежности культур их изучают в реакции
дят по капсульному антигену, по которому их
агглютинации на стеклес поливалентными агглю-
подразделяют на 6 серологических вариантов:
тинирующими сыворотками. Сероварианты энте-
а, Ь, с, d, e, f. Для такого исследования исполь-
робактерий определяют в реакции агглютинации
зуют поли- и моновалентные диагностические
с наборами О, Vi, H, К монорецепторных сыво-
сыворотки в реакции агглютинации на стекле.
роток.
327
Т а б л и ц а 56. Внутриродовая дифферен-
Т а б л и ц а 53. Внутриродовая дифференциа-
циация рода Proteus
ция рода Klebsiella
Виды
Тест,
P. m i r a - P. v u l - P. mor- P. ret- P. in-
субстрат con-
bilis garis ganii tgeri
stans

Мочеви-

на + +
+ +
Индол — + + + +
— — —
H2S + +
Цитрат
по Сим-
м он с у —
2
± + +
( + )'
Желати-
на — — —
+ +
Мальто-
П р и м е ч а н и я . 1 — разные биовариан- — — — —
за +
ты; 2 — замедленно. — — — —•
Маннит +
Орни-
Т а б л и ц а 54. Внутриродовая дифференциа- ти н де -
карбок-
ция рода Enterobacter
сил а за + +

— замедленно; 2 — разные
Примечания,
биоварианты.




мость в их дифференциальной диагностике. На-
бор ориентировочных тестов представлен в
табл. 58.
Р о д м о р а к с е л л а (Moraxella) состоит из
Т а б л и ц а 55. Внутриродовая дифферен- 7 видов, встречающихся у человека. Иногда
циация рода Yersinia моракселлы являются причиной воспалитель-
ных заболеваний человека — конъюнктивита,
вульвовагинита, менингита, плеврита. Предста-
вители рода моракселла не растут на простых
питательных средах, а требуют добавления
5—10 % крови животных или сыворотки. Коло-
нии крупные, полупрозрачные, гладкие, нежные,
слизистые.
Р о д а ц и н е т о б а к т е р (Acinetobacter)
представлен 2 видами — A. calcoaceticus и
A. Iwoffii. Эти микроорганизмы могут выде-
ляться из цереброспинальной жидкости и мокро-
ты при заболеваниях нижних дыхательных
путей, бронхоэктатической болезни, конъюнкти-
витах, хронических отитах, со слизистой оболоч-
ки мочеполового тракта. Они обычно хорошо
культивируются на простых питательных средах,
однако при первичном выделении лучше испо-
льзовать среды с добавлением крови или сыво-
Результаты более четкие по Христенсену.
ротки. A. calcoaceticus образуют на кровяном
Разные биоварианты.
агаре относительно большие (2—3 мм), бело-
ватые, выпуклые, иногда слизистые колонии,
A. I w o f f i i — серые, плоские, немного мельче
В патологии человека наибольшее значение име-
колонии. 10— 20 % культур дают b-гемолиз.
ют штаммы инфлюэнцы с капсульным антиге-
Микробы рода Moraxella и Acinetobacter при
ном типа b.
В связи с тем что микроорганизмы, относя- окраске по Граму имеют форму коротких округ-
щиеся к разным родам, вызывают заболевания, лых палочек, часто напоминают кокки, но могут
имеющие сходную клиническую картину, и могут встречаться самые разнообразные формы кле-
ток, даже нитевидные, располагаются клетки
быть обнаружены в том же патологическом
материале, что и гемофилы, возникает необходи- парами, короткими и длинными цепочками.

330
Таблица 57. Свойства микробов рода гемофилус




2
П р и м е ч а н и я : ' — б е з дрожжевых добавок; — использован реактив диметил-п-фенилендиамин;
- положительная реакция у капсульных штаммов.




Т а б л и ц а 58. Биохимические свойства некоторых гемофилов и других микробов, выделенных из
общих источников


Тест, субстрат




331
Т а б л и ц а 59. Биохимические свойства видов Moraxella, встречающиеся у человека




Все виды моракселл углеводы не утилизируют, за исключением M.kingae.


Т а б л и ц а 60. Биохимические свойства видов Acinetobacter
Тест, субстрат




П р и м е ч а н и я . О — окисляется; F — ферментируется.


Т а б л и ц а 61. Дифференцирующие свойства микробов, патогенных для человека, родов Chrotno-
bacterium, Flavobacterium, Cardiobacteria, Pasteurella
Тест




В последние годы все чаще из клинических
Колонии, подозрительные на моракселлы или
материалов выделяют некоторые виды бактерий,
на ацинетобактер, отсевают секторами на чашку
представители которых обычно обитают на объ-
Петри или косяки с сывороточным агаром для
ектах внешней среды, растений или имеют опре-
получения чистой культуры.
деленный уровень патогенности для животных.
Видовые особенности моракселл и ацинето-
Chromatobacterium v i o l a c e u m обнаруживают
бактер даны в табл. 59, 60.

332
улучшает рост. На кровяных средах формируют
Т а б л и ц а 62. Свойства микробов рода
Bordetella очень мелкие круглые, выпуклые, матовые
колонии, вокруг которых наблюдается легкое
позеленение среды. Характерные особенности
этой группы бактерий и их дифференциация
представлены в табл. 61.
Pasteurella multocida, как и представители
рода Bordetella, иногда вызывает респиратор-
ные и другие воспалительные процессы глотки,
бронхов, тонзиллофарингиты, ларинготрахео-
бронхиты. По морфологии все они мелкие корот-
кие грамотрицательные палочки или коккоба-
циллы. При росте на кровяных средах P. multo-
cida образует мелкие колонии с коричневым
окрашиванием среды; Bordetella растут на спе-
циальных средах (Борде—Жангу, казеиново-
угольный агар) в виде мелких, гладких, блестя-
щих колоний с жемчужным или сероватым
оттенком. Основные свойства по дифференциа-
ции бактерий этой группы даны в табл. 62.
при гнойных и септических заболеваниях чело-
века. Это грамотрицательные палочки, прямые
или слегка изогнутые с закругленными концами; 7.4.3. Грамотрицательные
в мазках располагаются одиночно, парами, ко- анаэробные палочки
роткими цепочками; иногда наблюдается бипо-
В р о д б а к т е р о и д е с ( G e n u s В а-
лярное окрашивание клеток. На поверхности
агара формируются мелкие, гладкие, блестящие cteroides) включено 22 вида микроорганизмов;
колонии фиолетового цвета. Flavobacterium некоторые из них выделены от человека и при
meningosepticum могут быть причиной менинги- определенных условиях могут быть патогенны:
тов, особенно у новорожденных, а в ассоциации В. f r a g i l i s , В. ruminicola, В. serpens, В. coagu-
с другими микробами — септицемии. Это грам- lans, В. pneumosintes, В. melaninogenicus,
отрицательные тонкие палочки, иногда коккоба- В. oralis.
циллы. На плотных средах колонии мелкие, По морфологии — это грамотрицательные
гладкие, выпуклые, блестящие, прозрачные, полиморфные палочки, неподвижные или под-
маслянистые, серо-белого цвета, на кровяных вижные благодаря перетрихиальным жгутикам.
средах вызывают легкое позеленение среды. Строгие анаэробы. Реакция на каталазу отрица-
Cardiobacterium hominis — обычный обита- тельная. Бактероиды при росте на питательных
тель слизистых оболочек верхних дыхательных средах, содержащих пептон и глюкозу, при
путей человека, однако ее выделяют при эндо- рН 7,0 вырабатывают смесь кислот: уксусную,
кардитах, особенно после операционных вмеша- молочную, пропионовую, а также масляную,
тельств на сердце. Эти полиморфные палочки изомасляную и изовалериановую. Растут на
в мазках располагаются отдельными клетками, плотных питательных средах с кровью, сыворот-
парами, короткими цепочками или группами. кой, на сердечно-мозговом агаре, в атмосфере
При окраске по Граму плохо обесцвечиваются, природного магистрального газа.
поэтому в мазках можно видеть вариабельно Характерным признаком для анаэробной
окрашенные клетки. На простых средах растут бактероидной инфекции является наличие
очень скудно, добавление сыворотки и крови фекального или гнилостного запаха.

Т а б л и ц а 63. Биологические свойства часто выделяемых бактероидов
Тест, субстрат




П р и м е ч а н и я . (±) — биоварианты; (..) — нет данных; ' — черный пигмент.

333
Т а б л и ц а 64. Основные биохимические свойства нейссерий и бранхамеллы




блестящей поверхностью и ровными краями
Выделение чистой культуры и изучение био-
маслянистой консистенции, не лизируют эрит-
химических свойств бактероидов затруднено
роцитов. На свежеприготовленном сывороточ-
из-за их быстрой потери жизнеспособности при
ном агаре менингококки имеют вид бесцветных,
пересевах. Идентификация некоторых видов
опалесцирующих, плоских, круглых колоний
бактероидов представлена в табл. 63.
с ровным краем, не имеющих валика и уплотне-
ния в центре.
7.4.4. Грамотрицательные аэробные Непатогенные нейссерий растут на поверхно-
и факультативно-анаэробные кокки сти кровяного агара в виде либо круглых глад-
ких с ровными краями, блестящей поверхностью
колоний, либо неправильной формы с неровными
В р о д н е й с с е р и я (Neisseria.), согласно
краями шероховатых колоний с причудливо
Bergey (1974), включено 6 видов, которые выде-
изрезанной поверхностью. На кровяном агаре
ляются от человека: патогенные виды —
колонии непатогенных нейссерий мельче коло-
N. m e n i n g i t i d i s , N. gonorrhoeae и так называе-
ний стафилококка, но крупнее стрептококка и
мые непатогенные нейссерий — N. mucosa,
N. sicca, N. s u b f l a v a , N. flavescens. N. s u b f l a v a палочки инфлюэнцы, не зеленят кровяной агар.
включает три пигментообразующие самостоя- Непатогенные нейссерий растут на поверх-
тельные группы — N. s u b f l a v a , N. perflava и ности сывороточного агара в виде сероватых,
N. f l a v a . желтоватых либо бесцветных колоний диамет-
N. meningitidis — возбудитель эпидемиче- ром от 1 до 3 мм. Пигмент накапливается при
ского цереброспинального менингита, менинго- культивировании на сывороточных средах через
кокцемии. N. gonorrhoeae — возбудитель гоно- 48—72 ч.
В мазках из подозрительных на нейссерий
реи. Другие виды нейссерий являются коменса-
колоний, окрашенных по Граму, видны грам-
лами. При определенных условиях признана их
отрицательные бобовидные, округлые кокки,
роль в развитии менингитов, эндокардитов, сеп-
расположенные попарно и довольно равномерно
сиса, пневмоний, отитов, синуситов и других
распределяющиеся в поле зрения; из шерохова-
заболеваний.
Для выделения нейссерий используют пита- тых колоний — грамотрицательные кокки в виде
скоплений. Клетки микробной популяции имеют
тельный агар (рН 7,2—7,4), содержащий не
однородное окрашивание у нейссерий, могут
менее 1,6 г/л аминного азота, с добавлением
быть полиморфно окрашены у менингококков,
5—10 % крови или 10—20 % инактивирован-
а вследствие лизиса части клеток у гонококков
ной лошадиной сыворотки. Чашки с посевами
всегда имеются более светлоокрашенные особи.
следует поставить в эксикатор с зажженной сте-
С сывороточного агара ставят пробы на окси-
ариновой свечой, после сгорания кислорода бу-
дазу и каталазу '. Положительные пробы на
дет обеспечен рост культур в атмосфере с повы-
оксидазу и каталазу у грамотрицательных кок-
шенной концентрацией СO2. В этих условиях
культивирования хорошо растут как патогенные,
так и непатогенные виды нейссерий. Через 24 ч
выращивания при 37 °С на плотной среде изу-
чают морфологию выросших колоний. Менин-
1
гококки на кровяных средах растут в виде непро- Реакцию на каталазу с 10 % Н2О2 нельзя
зрачных, беловато-серых, крупных колоний с ставить с питательных сред с нативной кровью.

334
ков позволяют предположить, что исследуемая Т а б л и ц а 65. Биологические свойства
колония относится к одному из видов нейссерий. видов стафилококка
Подозрительные колонии отсевают секторами
на ч а ш к и Петри или косяки с сывороточным а г а -
ром для получения чистой культуры. С целью
определения видовой принадлежности нейссе-
рий используют: жидкие или полужидкие среды
Хью — Лейфсона, содержащие глюкозу, маль-
тозу, лактозу, сахарозу, фруктозу с двойной кон-
центрацией индикатора Андреде, среды для
определения редукции нитратов и нитритов с
2—3 к а п л я м и лошадиной сыворотки, агар с
5 % сахарозы для определения полисахаридо-
образования (с помощью раствора Люголя),
агар из гидролизата казеина для учета йодной
реакции (0,25 % раствор йода наносят на по-
верхность культур, посеянных б л я ш к а м и ) .
Видовые особенности рода Neisseria пред-
ставлены в табл. 64.
В случае выделения культур, подозритель-
ных на N. m e n i n g i t i d i s , проводят определение
капсульного антигена, используя диагностиче-
ские поливалентные и групповые менингококко-
вые агглютинирующие или преципитирующие
сыворотки (см. Методические указания. Приказ
№ 98 МЗ СССР от 29.01.81 г. по бактериологи-
ческой диагностике менингококковой инфекции
и бактериальных менингитов).
В род бранхамелла (Branha-
m е 1 1 а) пока включен один вид В. c a t a r r h a l i s .
Он постоянно обнаруживается на слизистых
верхних дыхательных путей и мочеполового Биологические свойства и дифференциация
тракта. Имеются случаи выделения В. catarrhalis видов стафилококка представлены в табл. 65.
при менингитах, острых ф а р и н г и т а х , бронхитах. При необходимости внутривидовой иденти-
фикации используют метод фаготипирования.
Методика его проведения, учета результатов,
определение фагогрупп и их наименований изло-
7.4.5. Грамположительные жены в инструкции по применению набора ста-
факультативно-анаэробные кокки филококковых фагов, выпускаемых в стране.
Иногда для маркирования штаммов используют
Род с т а ф и л о к о к к а (Staphylo- их ферментативную активность, позволяющую
определить биоварианты.
c o c c u s ) . Согласно современной классифика-
ции (Берджи, 1974), состоит из трех видов: Род стрептококков (Strepto-
S. epidermidis, S. aureus, S. saprophytic.us. Они c o c c u s ) объединяет очень большую группу
представляют собой грамположительные кокки, микроорганизмов, характеризующихся шаро-
располагающиеся парами, отдельными клетка- видной или овальной формой клеток. В мазках
ми и гроздьями. Спор и капсул не образуют. микробы располагаются парами, к у ч к а м и , це-
Неподвижны. Аэробы или факультативные почками р а з л и ч н о й длины. Стрептококки — фа-
анаэробы. Хорошо растут на простых питатель- культативные анаэробы, грамположительные,
ных средах при температуре от 6,5 до 46 °С, спор не образуют, неподвижны, за исключением
лучше — при 37°С. Переносят повышенное некоторых штаммов энтерококка. Реакция на
содержание NaCl в среде от 5 до 10 %. Электив- ферменты каталазу и оксидазу отрицательна.
ной является желточносолевая среда, содержа- На плотных питательных средах с кровью стреп-
щая 7,5 % NaCl. О н а л и ч и и лецитиназы свиде- тококки через 24 ч роста при 37°С образуют
тельствует образование вокруг колоний через мелкие 1—2 мм прозрачные, полупрозрачные
18—24 ч в ы р а щ и в а н и я радужного венчика. или непрозрачные колонии, сероватые или бес-
Колонии стафилококка круглые, гладкие, цветные, гомогенные или зернистые. Одни виды
блестящие, матовые. Пигмент белый или золоти- обладают гемолитической активностью, от резко
стый разных оттенков, четко выявляется через выраженного гемолиза с полным просветлением
среды (b-гемолиз) до разной степени ее позеле-
24—36 ч роста.
нения (а-гемолиз). Имеются виды, не обладаю-
Стафилококки вида ауреус обладают способ-
щие гемолитической способностью. Стрептокок-
ностью продуцировать экзотоксины, гемоли-
ки хорошо растут на жидких питательных средах
зины, лейкоцидины, имеют ферменты: коагулазу,
лецитиназу, ДНК-азу, фибринолизин, гиалуро- с 0,2 % глюкозы, на полужидких и плотных сре-
дах с 5 % крови или 10 % инактивированной
нидазу и др. Тесты на наличие коагулазы и
ДНК-азы являются ведущими при определении сыворотки ж и в о т н ы х , оптимальное значение рН
7,6—7,8.
S. aureus.

335
S. agaiactiae ( г р у п п а В) обычно обитают на
Т а б л и ц а 66. Дифференциальные свойства
слизистой влагалища, могут вызывать послеро-
некоторых представителей группы зеленящих
довые инфекции, сепсис, менингиты новорож-
стрептококков '
денных, стоматиты. На кровяном агаре вокруг
колоний образуется узкая зона р-гемолиза. Ге-
молитическая активность резко возрастает, если
рядом растут штаммы стрептококков или стафи-
лококков, обладающие гемолитической актив-
ностью (САМР-тест). Для этого на чашку с кро-
вяным агаром (5 % бараньих эритроцитов)
наносят по диаметру чашки культуру S. aureus,
а затем в виде полос перпендикулярно к стафи-
лококку ряд изучаемых культур стрептококка.
Только S. agaiactiae образует зону усиленного
гемолиза.
S. faecalis (группа D), являясь н о р м а л ь н ы м и
обитателями кишечного тракта, могут быть при-
чиной сепсиса, перитонита, острых поражений
кишечника, раневых инфекций, эндокардитов,
поражений мочевыводящих путей (см. табл. 68).
Стрептококки других групп (гемолитические
и зеленящие) могут вызывать легко протекаю 1
щие воспалительные процессы, иногда являясь
п р и ч и н о й длительно текущих эндокардитов.
Определенные виды зеленящих стрептококков
рассматривают как возбудителей кариеса зубов,
некоторых заболеваний слизистой ротовой поло-
сти. Тесты их ориентировочной дифференциа-
ции — см. табл. 66.
S. pneumoniae, согласно современной класси-
фикации, включен в род стрептококка на уровне
вида. S. pneumoniae является причиной острой
долевой пневмонии, сепсиса, острых синуситов,
отитов, а также бактериального менингита.
Пневмококки — ланцетовидные, грамполо-
1
См.: Hardie J. M., Bowden G. H. J. Dent. Res., жительные диплококки с заостренными наруж-
1976, vol. 55, p. 166—176.
ными концами, каждая пара кокков окружена
капсулой, часто видны короткие и длинные
цепочки. Для выделения пневмококков исполь-
зуют питательный агар на гидролизате Хоттин-
гера ( а м и н н ы й азот 1,6—1,7 г/л, рН 7,6), содер-
Гемолитические штаммы стрептококка на
жащий 5 % крови (кролика, барана, человека)
жидких и полужидких питательных средах дают
и 5—10 % дрожжевого экстракта. На кровяном
пристеночный рост с придонным осадком без
агаре колонии пневмококка гладкие, блестящие,
помутнения питательной среды. Зеленящие
полупрозрачные, плоские, 0,5—1 мм в диаметре,
стрептококки вызывают общее помутнение сре-
окружены зеленящей зоной а-гемолиза. С воз-
ды с образованием придонного осадка.
растом центр колоний подвергается аутолизу
Основные дифференциальные свойства неко-
и западает, колонии приобретают вид «шашки».
торых видов рода стрептококков представлены
Встречаются слизистые сливные колонии. Для
в табл. 66—68.
дифференцирования от других зеленящих стреп-
В настоящее время описано 17 серологиче-
тококков используют способность S. pneumoniae
ских групп стрептококка, обозначенных латин-
ферментировать инулин, чувствительность к
скими буквами от А до Т (по Ленсфильд), такое
оптохину и желчи (см. табл. 66).
деление основано на наличии у представителей
По капсульному полисахариду пневмококки
разных групп группоспецифияеского антигена.
Серологическую группу стрептококков опреде- делятся на 83 типа. Для серологического типи-
ляют в реакции преципитации с иммунными рования используют реакцию набухания кап-
групповыми сыворотками. сулы по Нейфельд или реакцию агглютинации
Наиболее патогенен для человека вид S. руо- на стекле с поливалентными, групповыми и типо-
genes (группа А ) . Эти стрептококки являются выми сыворотками. Метод проведения серологи-
возбудителями многих гнойно-воспалительных ческого анализа и обозначение капсульных ва-
процессов человека: скарлатины, ангин, рожи- риантов приложены к наставлению по примене-
стого воспаления кожи, септицемии, отитов, хро- нию диагностических сывороток.
нических стрептококковых инфекций — рев- Оптохиновый тест. Чистую культуру засе-
матизма, гломерулонефрита. Они формируют вают на агар, содержащий 1 : 50 000—1 : 100000
мелкие, непрозрачные, зернистые колонии с зо- оптохина. На следующие сутки учитывают ре-
ной полного гемолиза, диаметр которого в не- зультат. Пневмококки не растут в присутствии
сколько раз превышает диаметр самой колонии. оптохина. Можно использовать бумажные диски

336
Т а б л и ц а 67. Основные дифференциальные свойства некоторых видов стрептококков




П р и м е ч а н и я . 1 — прозрачная зона гемолиза вокруг колоний на агаре с 5 % крови; 2 — зеленоватое
о к р а ш и в а н и е и частичный гемолиз вокруг колоний; 3 — нет гемолиза на агаре с кровью; 4 — серотипирование
стрептококков группы А проводят с помощью преципитирующих стрептококковых сывороток группы А, вы-
пускаемых ИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи АМН СССР.




Т а б л и ц а 68. Схема дифференциальной диагностики энтерококков

Тест, субстрат




См. Седов В. И. Методические рекомендации по выделению и идентификации энтерококков.— М., 1982.
S.faecium var. durans.

12 п / р . В. В. Меньшикова 337
Т а б л и ц а 69. Основные свойства некоторых с 6 мкг оптохина, которые накладывают после
видов рода Peptococcus посева на поверхность среды (посев лучше
проводить секторами). Пневмококки вокруг
диска образуют зону задержки роста не менее
18 мм.
Желчный тест основан на способности 10 %
желчи и 2 % раствора оксихолатов лизировать
пневмококк. В две пробирки с 2—3 мл сыворо-
точного бульона с 10 % желчи крупного рога-
того скота и без нее добавляют 0,5—1 мл испы-
туемой бульонной культуры и выдерживают
1 ч при 37 °С. При лизисе пневмококка отмеча-
ется просветление бульона по сравнению с конт-
ролем. При сомнительном результате пробирки
оставляют при комнатной температуре до сле-
дующего дня и проводят окончательный учет
результатов.


7.4.6. Грамположительные
анаэробные кокки
Т а б л и ц а 70. Основные свойства некоторых
видов рода Peptostreptococcus Представители семейства пептококковых
обитают на слизистых ротовой полости, пищева-
рительного, респираторного, урогенитального
тракта человека и животных. При определенных
условиях могут вызывать тяжелые заболевания
в ассоциации с другими микроорганизмами.
В р о д п е п т о к о к к а (Genus Peptococ-
cus) — анаэробные микрококки — включены виды:
P. niger, P. asaccharalyticus, P. activus, P. апае-
robius, P. aerogenes. По морфологии грамполо-
жительные кокки располагаются поодиночке,
парами, группами. Цепочек никогда не обра-
зуют, неподвижные, спор не образуют, ана-
эробы. Растут на специальных средах для ана-
эробов ' в анаэростате. Гемолиз отсутствует.
Реакции на каталазу и редукцию нитратов поло-
жительные.
Дифференциация видов представляет боль-
шие трудности и основывается на комплексе
свойств (табл. 69).
В р о д п е п т о с т р е и т о к о к к а (Genus
Peptostreptococcus) — анаэробные стрептокок-
ки — включены виды: P. anaerobius, P. productus;
P. lanceolatus, P. micros, P. p a r v u l u s . По мор-
П р и м е ч а н и е . ( + ) — слабая реакция.
фологии это грамположительные кокки, распо-
лагающиеся п а р а м и или цепочками разной
длины, неподвижны, спор не образуют, ана-
Т а б л и ц а 71. Дифференциация представите-
эробы. Для выращивания их используют специ-
лей рода Bacillus
альные среды для культивирования анаэробов 2 .
Реакции их на каталазу и редукцию нитратов
отрицательные. Дифференциация видов пред-
ставляет большие трудности (табл. 70).


7.4.7. Грамположительные аэробные
и факультативно-анаэробные палочки
Р о д б а ц и л л а ( B a c i l l u s ) состоит
из 48 видов', но лишь несколько видов можно
рассматривать как имеющие значение в патоло-


1
См. с. 315.
П р и м е ч а н и я . 1 — В. cereus var. mycoides
2
обычно неподвижен; 2 — вирулентные ш т а м м ы . См. с. 315.

338
Т а б л и ц а 72. Основные биологические свойства нокардий




жевый, красный. N. asteroides выделяется при
гии человека: В. anthracis, В. subtilis, В. cereus,
кожных поражениях человека, N. lutea — в слу-
В. pumilus.
чаях актиномикоза и при воспалениях слезных
В. anthracis является возбудителем сибир-
желез. Основные биологические свойства пред-
ской язвы. Другие виды рода B a c i l l u s широко
ставлены в табл. 72.
распространены в воде, воздухе, почве, пищевых
Род к о р и н е б а к т е р и й (Согупе-
продуктах, выделяются из организма человека
b a c t e r - i u m ) объединяет около 20 групп
и животных. Их патогенная роль для человека
грамположительных палочек. Часть из них
и животных невелика. В последние годы име-
представляет интерес для клинических микро-
ются сообщения, что спорообразующие аэроб-
биологов. С. pseudodiphtheriticum является по-
ные бактерии могут быть причиной септицемии,
стоянным обитателем слизистых и кожи чело-
пневмоний, пищевых отравлений и других вос-
века. С. xerosis обычно выделяют со слизистой
палительных процессов человека.
По морфологии эта группа микробов пред- оболочки слезного канала, но может быть при-
чиной длительно и вялотекущих конъюнкти-
ставляет собой грамположительные или грам-
витов. С. d i p h t h e r i a e вызывает дифтерию.
вариабельные палочки, расположенные отдель-
Виды, перечисленные ниже, постоянно пара-
ными клетками или цепочками (В. cereus).
зитируют на слизистых оболочках глотки, носа,
Аэробы или факультативные анаэробы. Споры
трахеи здоровых лиц, но могут быть причи-
образуются только в аэробных условиях, устой-
ной инфекционно-воспалительных процессов:
чивы к нагреванию. Реакция на каталазу поло-
С. ulcerans — дифтериеподобных заболеваний
жительная, реакция на оксидазу отрицательная.
с поражением слизистых верхних дыхательных
Микробы рода B a c i l l u s не требовательны к пита-
путей, С. m i n u t i s s i m u m — характерных кожных
тельным средам. Указанные выше виды бацилл
поражений человека (эритразмы), С. pseudo-
образуют различные формы колоний на простых
tuberculosis — абсцессов с язвенно-некротиче-
питательных средах от мелких, гладких и слегка
скими очагами, язвенных лимфаденитов, С. еп-
желтоватых (В. p u m i l i s ) до крупных, круглых,
шероховатых, неправильной формы, с матовой z y m i c u m — тяжелой абсцедирующей бронхо-
извилистой поверхностью; колонии с возрастом пневмонии, С. pyogenes и С. h a e m o l y t i c u m спо-
приобретают окраску от кремовой до коричневой собны вызывать у человека язвенно-некротиче-
(В. subtilis, В. cereus). На бульоне рост в виде ские поражения в виде фарингитов, тонзилли-
поверхностной морщинистой пленки, без помут- тов, гингивостоматитов, уретритов и поражений
нения среды (за исключением В. a n t h r a c i s , кожи. С. v a g i n a l i s — группа мелких палочек,
В. cereus). Минимальный набор тестов, позво- вариабельно окрашивающихся по Граму; их
ляющих ориентировочно дифференцировать выделяют со слизистой оболочки влагалища
бациллы до вида, представлен в табл. 71. здоровых женщин, но они могут вызывать вяло-
текущие вагиниты.
И з р о д а н о к а р д и я (Genus N o c a r d i a ) .
N. asteroides и N. l u t e a могут быть выделены По морфологии все коринебактерий — грам-
от человека. По морфологии — грамположитель- положительные полиморфные палочки, не вет-
ные палочки, способные к образованию мице- вятся. Спор и капсул не образуют. Подвиж-
лия, воздушных гифов и ветвящихся нитей. Спор ностью не обладают. Слегка изогнутые изящные
не образуют. Строгие аэробы. Неподвижны. палочки с булавовидными утолщениями на кон-
Реакция редукции нитратов непостоянна. Кис- цах, располагающиеся в виде войлока, пакета
лотоустойчивость зависит от вида. Хорошо ра- булавок, букв VL, содержащие темноокрашен-
стут на простых питательных средах. Образуют ные зерна на концах — морфология, характер-
ная для С. diphtheriae, С. ulcerans и С. pseudo-

<<

стр. 18
(всего 20)

СОДЕРЖАНИЕ

>>